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高分辨率琼脂糖图片
产品货号:
KD0160
中文名称:
高分辨率琼脂糖 ,Biotech Grade
英文名称:
HR Agarose
产品规格:
5g|25g|250g
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

CAS号:39346-81-1
保存:RT

产品说明:
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。
本品为PCR级高分辨率琼脂糖,对PCR产物、小片段DNA具有较高的分辨率,适宜分离20bp~800bp的DNA片段,其分离效果可与聚丙烯酰胺相媲美。此外,还具有如下特点:1)易溶解,胶液更清澈,可以配制高达5%的凝胶;2)很低的背景;3)品质稳定等。
琼脂糖的基本参数:
1.)硫酸盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;
2.)凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力大小;
3.)胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点。
4.)电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
凝胶制备:
1.配制合适浓度的电泳及制胶用的缓冲液。
注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2.根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角瓶中,加入准确称量的HR
琼脂糖(总液体量不宜超过三角锥瓶容量的50%)。并充分混匀。
3.在微波炉中加热溶解HR琼脂糖,设置中火加热至沸腾,保持胶液沸腾约30秒钟,戴上防热手套,移开三角瓶,小心摇动三角瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热1分钟,或直至HR琼脂糖完全溶解。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使HR琼脂糖胶液充分均匀。
注:必须保证HR琼脂糖充分完全溶解,胶液清澈。否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4.溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液(终浓度为0.5μg/mL),或加入本公司生产的无毒的Labred(同Gelred)核酸染料
注:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴手套。
5.将HR琼脂糖溶液倒入制胶模中,在适当位置处插上梳子。凝胶厚度在3~5mm之间。
6.在室温下使胶凝固(大约30分钟~1小时),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存2~5天。
电泳结果:
电泳图片
A为20bp DNA Ladder;B为50bp DNA Ladder。电泳液1×TAE;2%~4%高分辨率琼脂糖溶解于1×TAE;12cm凝胶5v/cm跑2.5小时。
注意事项:
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
相关搜索:高分辨率琼脂糖HR Agarose39346-81-1
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